کلونینگ ژن گلوکز اکسیداز آسپرژیلوس نایجر در پروکاریوت ها (وکتور pkk۲۲۳-۳)

نویسندگان

جمشید راهب

j. raheb center of genetic engineering and biotechnology, tehran, iran.پژوهش گاه ملی مهندسی ژنتیک و زیست فن آوری آمنه محقق

a. mohaghegh payame noor university ,tehran, iran.دانشگاه پیام نور مرکز تهران محمدرضا اکبری عیدگاهی

m.r. akbari-eidgahi research center of biotechnology, semnan university of medical sciences, semnan, iran.دانشگاه علوم پزشکی و خدمات بهداشتی درمانی سمنان، مرکز تحقیقات بیوتکنولوژی علی اکبر شعبانی

a.a. shabani research center of biotechnology, semnan university of medical sciences, semnan, iran.دانشگاه علوم پزشکی و خدمات بهداشتی درمانی سمنان، مرکز تحقیقات بیوتکنولوژی الهام آقایی

چکیده

سابقه و هدف: گلوکز اکسیداز، آنزیمی است که در صنایع غذایی، شیمیایی، آرایشی و بهداشتی و هم چنین در کیت های تشخیص گلوکز استفاده می شود. در مرحله اول این طرح dna از قارچ رشته ای آسپرژیلوس نایجر atcc9029 با استفاده از روش سونیکاسیون و لیز در نیتروژن مایع جدا شد. سپس dna ژنومیک استخراج شده در پلاسمید ptz57r کلون شد، در ادامه این طرح، ژن گلوکزاکسیداز (go) به وکتور بیانی دیگر (pkk223-3) وارد شد، که پایه ای برای تولید این آنزیم در ایران می باشد. مواد و روش ها: پلاسمید نوترکیب pet21αg0 از باکتری dh5α-e. coli استخراج و توسط آنزیم های محدودکننده bamhi و hindiii برش داده و ژن گلوکز اکسیداز به طول kb8/1 جدا و سپس به داخل پلاسمید pkk223-3 وارد شد و در داخل میزبان e. coli-dh5αترانسفورم گردید. نقشه ژنی این پلاسمید نوترکیب با آنزیم های محدودکننده، تأیید و پلاسمید pkk223-3go نامیده شد. یافته ها: ژن کدکننده آنزیم گلوکز اکسیداز که به وسیلها restriction enzyme ز پلاسمید pet21α جدا شده بود، دارای اندازه صحیح در الکتروفورزیس ژل آگارز می باشد. ما نشان دادیم که پلاسمید نوترکیب pkk223-3go در restriction analysis دارای الگوی صحیح می باشد. نتیجه گیری: جداسازی و کلونینگ ژن گلوکز اکسیداز از طریق مهندسی ژنتیک می تواند برای کلونینگ در وکتور بیانی به منظور تولید این آنزیم به صورت نوترکیب به کار رود.

برای دانلود باید عضویت طلایی داشته باشید

برای دانلود متن کامل این مقاله و بیش از 32 میلیون مقاله دیگر ابتدا ثبت نام کنید

اگر عضو سایت هستید لطفا وارد حساب کاربری خود شوید

منابع مشابه

کلونینگ ژن گلوکز اکسیداز آسپرژیلوس نایجر در پروکاریوت‌ها (وکتور PKK223-3)

سابقه و هدف: گلوکز اکسیداز، آنزیمی است که در صنایع غذایی، شیمیایی، آرایشی و بهداشتی و هم‌چنین در کیت‌های تشخیص گلوکز استفاده می‌شود. در مرحله اول این طرح DNA از قارچ رشته‌ای آسپرژیلوس نایجر ATCC9029 با استفاده از روش سونیکاسیون و لیز در نیتروژن مایع جدا شد. سپس DNA ژنومیک استخراج شده در پلاسمید PTZ57R کلون شد، در ادامه این طرح، ژن گلوکزاکسیداز (GO) به وکتور بیانی دیگر (PKK223-3) وارد شد، که پای...

متن کامل

جدا سازی ژن گلوکز اکسیداز آسپرژیلوس نایجر و کلونینگ آن در پروکاریوت ها

سابقه و هدف: گلوکزاکسیداز آنزیمی است که در صنایع غذایی، شیمیایی، آرایشی و بهداشتی و همچنین در کیت های تشخیص گلوکز استفاده می شود. هدف این مطالعه شناسایی و جداسازی این ژن از ژنوم قارچ آسپرژیلوس نایجر از طریق pcr و کلونینگ آن درe. coli به منظور پایه ای برای تولید گلوکزاکسیداز نوترکیب در ایران است. مواد و روش ها: قارچ آسپرژیلوس نایجر (atcc 9029) در محیط حاوی پپتون و گلوکز و عصاره مالت و در حرارت º...

متن کامل

جدا سازی ژن گلوکز اکسیداز آسپرژیلوس نایجر و کلونینگ آن در پروکاریوت‌ها

سابقه و هدف: گلوکزاکسیداز آنزیمی است که در صنایع غذایی، شیمیایی، آرایشی و بهداشتی و همچنین در کیت‌های تشخیص گلوکز استفاده می‌شود. هدف این مطالعه شناسایی و جداسازی این ژن از ژنوم قارچ آسپرژیلوس نایجر از طریق PCR و کلونینگ آن درE. coli به منظور پایه‌ای برای تولید گلوکزاکسیداز نوترکیب در ایران است. مواد و روش‌ها: قارچ آسپرژیلوس نایجر (ATCC 9029) در محیط حاوی پپتون و گلوکز و عصاره مالت و در حرارت...

متن کامل

کلونینگ و امکان سنجی بیان ژن فیتاز قارچی آسپرژیلوس نایجر در باکتری اشرشیاکلی

علاقه به تولید آنزیم فیتاز در حقیقت به جهت افزایش دسترسی فسفر و دیگر مواد معدنی در جیره پرندگان و تک معده ای ها و کاهش آلودگی محیطی می باشد. جدایه از قارچ آسپرژیلوس نایجر که بزرگترین هاله را بر روی محیط کشت همراه با سوبسترای اختصاصی داشت، به عنوان سویه اصلی جهت جداسازی ژن فیتاز و کلونینگ آن در حامل ptz57 r/t در نظر گرفته شد. واکنش زنجیره ای پلیمراز برای تکثیر قطعه 1347 جفت بازی ژن phya انجام و ...

کلونینگ و بیان ژن فیتازباکتری اشرشیاکلی(appa)در پروکاریوت

فیتازها گروه ویژه‏ای از فسفاتازها می‏باشند که هیدرولیز مرحله به مرحله فسفات را از مولکول فیتات انجام می‏دهند، فیتات منبع اصلی ذخیره فسفات در دانه گیاهان می‏باشد. این دسته از آنزیم‏ها در بین گیاهان، آغازیان و حیوانات پراکندگی و گستردگی دارند ولی از این میان فیتازهای میکروبی امیدبخش بوده و مورد توجه می‏باشند. فیتاز تولید شده توسط اشرشیاکلی برای استفاده در صنعت مناسب می باشد. در این مطالعه به منظو...

منابع من

با ذخیره ی این منبع در منابع من، دسترسی به آن را برای استفاده های بعدی آسان تر کنید


عنوان ژورنال:
کومش

جلد ۶، شماره ۳، صفحات ۲۱۷-۲۲۲

میزبانی شده توسط پلتفرم ابری doprax.com

copyright © 2015-2023